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PCR - MOLEKULÁRIS BIOLÓGIA

PCR - MOLEKULÁRIS BIOLÓGIA

Vous souhaitez : déterminer une séquence pour identifier des mutations (mutations ponctuelles (SNPs), insertions, délétions) évaluer les liens de parenté entre individus ou populations mettre en évidence la présence d'un organisme donné dans un échantillon biologique réaliser un clonage dans un vecteur d'expression pour la synthèse d'une protéine recombinante... Ces analyses requièrent généralement une amplification de matériel génétique par une réaction enzymatique appelée PCR (Polymerase Chain Reaction). Cette réaction est généralement réalisée à partir d'ADN. Pour certaines applications spécifiques, on utilise comme matériel de départ de l'ADNc obtenu par transcription inverse d'ARN. Principe de la méthode Les molécules d'ADN, dans leur état naturel, sont constituées de deux brins complémentaires. Le passage à une température supérieure à 94 °C entraîne la séparation des deux brins de l'ADN et la destruction des structures secondaires (étape de dénaturation). Les molécules...